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細(xì)胞凋亡發(fā)生時(shí)，染色體DNA以核小體為單位發(fā)生降解，細(xì)胞核濃縮，碎裂的核物質(zhì)被胞膜包裹游離出細(xì)胞外，成為凋亡小體。這些特征性變化可以通過顯微鏡直接觀察，或用某些熒光染料染色后，在熒光顯微鏡下觀察，或進(jìn)行流式細(xì)胞分析。然而這些特征通常難以與壞死細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確區(qū)分。
凋亡早期階段，細(xì)胞膜雖然能夠維持結(jié)構(gòu)的完整，但喪失了其磷脂分子分布的非對稱性，導(dǎo)致細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine, PS）翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜外側(cè)，使凋亡細(xì)胞易被吞噬細(xì)胞識別。通過對膜上的磷脂酰絲氨酸進(jìn)行染色即可區(qū)分正常細(xì)胞與凋亡細(xì)胞，再進(jìn)一步對核進(jìn)行染色，由于有完整結(jié)構(gòu)的膜屏障，凋亡細(xì)胞的核無法被染色，而壞死細(xì)胞可以被染色，這樣就準(zhǔn)確地區(qū)分了凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。細(xì)胞凋亡時(shí)，伴隨一系列蛋白酶學(xué)的改變，多種Caspase活性變化參與凋亡的啟動(dòng)、執(zhí)行過程。檢測Caspase活性變化，是分析凋亡發(fā)生機(jī)制和特征的另一方法。某些情況下，凋亡細(xì)胞不具有全部的凋亡特征，例如特征性的DNA片段化不明顯，而出現(xiàn)DNA隨機(jī)降解；有時(shí)Caspase活性的改變與凋亡不相關(guān)，即凋亡時(shí)Caspase活性不變，而Caspase活性變化但無凋亡發(fā)生。總的來說，觀察凋亡時(shí)，應(yīng)該觀察反映凋亡不同特征的幾個(gè)指標(biāo)，綜合分析。
GenStar公司提供四種適合于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞分析的凋亡檢測試劑盒，分別針對細(xì)胞凋亡的不同特征性指標(biāo)，操作簡單快速，穩(wěn)定可靠。StarGlow Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit（Cat. No. C203-01，02）和StarGlow Annexin V-EGFPApoptosis Detection Kit（Cat. No. C201-01）檢測暴露在胞膜外的PS和凋亡細(xì)胞特征性核形態(tài)改變，靈敏度高、特異性強(qiáng)。StarGlow Fluorescent Staining Apoptosis Detection Kit（Cat. No. C202-01）通過對染色體DNA直接染色區(qū)分不同的細(xì)胞狀態(tài)，操作簡便快速、價(jià)格低廉，但特異性稍差。StarGlow One-step TUNEL Kit（Cat.No. C204-01）針對凋亡細(xì)胞特征性DNA片段化現(xiàn)象，靈敏度高、特異性好、適用范圍廣。建議將2~3種上述試劑盒結(jié)合使用，同時(shí)檢測同一樣品的不同指標(biāo)，便于對凋亡進(jìn)行客觀評價(jià)。