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1、一般我們摸索抗體的工作濃度及反應(yīng)條件都是采用點(diǎn)雜交，只需一塊很小的膜，一般我們用膜的邊角料，一般直接將蛋白點(diǎn)在膜上即可，每次2ul 然后烘干，反復(fù)點(diǎn)樣大約8ul 左右即可，注意點(diǎn)樣時(shí)，用槍頭尖把蛋白向四周拔下，然后直接抗體孵育顯色即可，抗體稀釋液一般100ul 即可，這樣即節(jié)省抗體，又節(jié)省膜。

2、另說(shuō)一下我們實(shí)驗(yàn)室孵育抗體的方法：

告訴你一種較好的節(jié)省抗體的方法，我們一般用96或24孔板的盒蓋用封口膜封住作為反應(yīng)板，先鋪約1ml抗體稀釋液，用反貼法，膜正面向下，注意不能有氣泡，可用膠鏟或找個(gè)干凈的試管在膜上滾動(dòng)去除氣泡，再加0.5 覆蓋足夠，還可以回收約1ml ，回收后的抗體有疊氮鈉加0.2%,保存于-20度，可放時(shí)間長(zhǎng)點(diǎn)，我最長(zhǎng)1月用，效果尚可，沒有的話直接放在4度，一般一周內(nèi)使用沒問題，我們一般重復(fù)1次使用，二抗建議不要重復(fù)使用，酶太容易失效了，再說(shuō)二抗很便宜，別省這點(diǎn)錢。但要注意，要把反應(yīng)板用另一個(gè)對(duì)稱的96或24孔板蓋子蓋好，然后保鮮膜包好，并放在濕盒以防抗體揮發(fā)。

PS：1）建議大家可去收集做MTT 實(shí)驗(yàn)的同學(xué)或其他人的96或24孔板的盒蓋，最好找到不同牌子的板子，這樣更容易找到兩塊可以對(duì)稱蓋好的盒蓋

2）封口膜大約150元一卷，做反應(yīng)板時(shí)只要剪一半即可，封口時(shí)雙手盡量將封口膜向四周拉，然后覆蓋盒蓋即可，一般我封3層，怕破嘛，哈，新手肯定要多練習(xí)，我剛開始時(shí)，用老大一塊膜才封好一層，現(xiàn)在只要四分子一塊即可。