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產品展示
試劑盒組成:
試劑盒組成
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保存
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20次(RP1201)
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50次
(RP1202)
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裂解液RL
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4℃避光
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25 ml |
55 ml
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沉淀劑A
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室溫
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2 ml
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4 ml
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去蛋白液RE
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室溫
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15ml
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30ml
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漂洗液RD
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室溫
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20ml
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40ml
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漂洗液RW
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4℃(一個月)
-20℃(長期) |
6 ml | 15 ml |
第一次使用前按說明加指定量乙醇 | |||
RNase-free H2O
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室溫 |
5 ml
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10ml
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70%乙醇
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室溫
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4ml RNase-free H2O
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9ml RNase-free H2O |
第一次使用前按說明加指定量乙醇
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|||
RNase-free
吸附柱RA
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室溫
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20個
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50個
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收集管(2ml)
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室溫
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20個
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50個
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產品說明:
改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA 酶, 然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜, 再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除, 最后低鹽的RNase free water將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。
植物組織RNA提取的難點
1、酚類化合物的干擾
許多植物組織特別是植物的果實和樹木類植物中富含酚類化合物。酚類物質的含量會隨著植物的生長而增加。因而從幼嫩的植物材料中更容易提取RNA。此外,針葉類植物的針葉中多酚的含量比在落葉植物的葉子中要高得多。在植物材料勻漿時,酚類物質會釋放出來,氧化后使勻漿液變?yōu)楹稚?,并隨氧化程度的增加而加深,這一現(xiàn)象被稱為褐化效應(brownins effect)。被氧化的酚類化合物(如醌類)能與RNA穩(wěn)定地結合,從而影影響RNA的分離純化。
2、多糖的干擾
多糖的污染是提取植物RNA時常遇到的另一個棘手的問題.,植物組織中往往富含多糖,而多糖的許多理化性質與RNA很相似,因此很難將它們分開。在去除多糖的同時RNA也被裹攜走了,造成RNA產量的減少:而在沉淀RNA
時,也產生多糖的凝膠狀沉淀,這種含有多糖的RNA沉淀難溶于水,或溶解后產生粘稠狀的溶液。由于多糖可以抑制許多酶的活性,因此污染了多糖的RNA樣品無法用于進一步的分子生物學研究。
3、蛋白雜質的影響
蛋白質是污染RNA樣品的又一個重要因素。由干RNase和多酚氧化酶亦屬于蛋白質,因而要獲得完整的、高質量的RNA就必須有效地去除蛋白雜質。
4、次級代謝產物的影響
從植物組織中提取高質量RNA的另一個難點是許多高等植物組織尤其是成熟組織能產生某些水溶性的次級代謝產物,這些次級代謝產物很容易與RNA結合并與RNA共同被抽提出來而阻礙具有生物活性的RNA的分離。
試劑盒特點:
◆ 快速去除多糖,上樣孔無多糖污染:
◆ 獨特多酚沉淀劑,防多酚氧化同時沉淀多酚:
◆ 獨創(chuàng)漂洗液RD,特異性洗掉基因組,確保得到的RNA無基因組污染:
◆ 成功提取進口TRIzol及Q公司試劑盒無法很好提取的多種植物RNA,包括仙人掌、仙人球、蘆薈、鳳梨、水仙、黃瓜、辣椒、胡蘿卜、玉米、大豆、百合、小麥、西紅柿、花菜、油菜籽等;
提取范圍:
仙人掌、仙人球、水仙、黃瓜、胡蘿卜、辣椒、西紅柿、煙草、玉米、大豆、百合、小麥、擬南芥和其他大多數(shù)植物。
產量:
每100mg組織10~50μg不等