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產(chǎn)品展示
一、試劑盒組成、儲存、穩(wěn)定性
試劑盒組成 保存
50 次
（DP4005）
100 次（DP4006）
抽提液 室溫 50 ml 100 ml
溶液 A（蛋白酶 K） -20℃ 750 ul 1.5 ml
溶液 B 室溫 5 ml 10 ml
蛋白沉淀液 室溫 18 ml 36 ml
溶液 C 4℃（一個月）
-20℃（長期）
25 ml 50 ml
洗脫緩沖液 EB 室溫 5 ml 10 ml
純化柱 室溫 50 個 100 個
收集管（2ml） 室溫 50 個 100 個
本試劑盒在室溫儲存 12 個月不影響使用效果。
注意事項
1． 溶液 B 低溫時可能出現(xiàn)析出和沉淀，可以在 65℃水浴幾分鐘幫助重新溶解，恢
復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。
2． 避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、PH 值變化，各溶液使用后應(yīng)及時蓋
緊蓋子。
二、原理簡介
獨特的抽提和裂解體系迅速裂解細胞（壁）和滅活細胞內(nèi)核酸酶，不需
要借助玻璃珠破壁，有效保證了基因組 DNA 的完整性，經(jīng)過特殊處理的純化
柱能有效的去除雜質(zhì)和腐殖酸，極大的提高了 DNA 的純度，用本試劑盒快速
簡便（1 小時內(nèi)）提取基因組 DNA 純度極高，適合做 PCR 等下游反應(yīng)。
三、試劑盒特點
1． 經(jīng)過特殊處理的純化柱能有效的去除雜質(zhì)和腐殖酸。
2． 兼容性強，適用于各種不同的水樣.
3． 不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
4． 快速，簡捷，單個樣品操作一般可在 60 分鐘內(nèi)完成。
5． 高純度，OD260/OD280典型的比值達 1.7～1.9，長度可達 23kb 左右，
可直接用于 PCR，Southern-blot 和各種酶切反應(yīng)。
四、注意事項（實驗前必須首先閱讀這部分?。?
1． 所有的離心步驟均可在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達到13，000 rpm
的傳統(tǒng)臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
溶液 B 低溫容易形成沉淀，可在 65℃水浴幫助溶解。
2. 由于水樣中微生物含量極少，電泳檢測可以選擇高靈敏度的可見光
透射儀（EP2018）或者 pgDtectTM匹克級核酸檢測系統(tǒng)，染料可以選
擇 SYBR GREEN I 或者 picoGreen。PCR 檢測可以選擇百泰克細菌 16S
擴增檢測試劑盒（PR8801）
【贏潤生物】定貨熱線：13787039481，0731－8912505 Email:info@yrbio.com 【贏潤生物】定貨熱線：13787039481，0731－8912505 Email:info@yrbio.com
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五、操作步驟
a．取水樣于離心管中13000rpm以上(或者超速離心)離心10-20分鐘，
倒掉上清，稱取 0.1--0.3g 沉淀到干凈的離心管中（如果沉淀小于
0.3g 或 0.3ml，可以不換離心管），加入 1ml 的抽提液，加入 5ul 的
溶液 A，Vortex 1-2 分鐘，充分混勻后 37℃水浴 10 分鐘（每隔 2-3
分鐘劇烈震蕩混勻）。
b．加入 100ul 溶液 B，Vortex 1-2 分鐘，充分混勻后 65℃水浴 10
分鐘（每隔 2-3 分鐘劇烈震蕩混勻）。
c．10000rpm 離心 10 分鐘取上清至新的 1.5ml 離心管。
d. 加入 1/3 體積的蛋白沉淀液，充分顛倒混勻。
e. 冰浴 8 分鐘，13000rpm 離心 10 分鐘取上清。
f. 純化柱的處理：在純化柱中間加入 500ul 的溶液 C，靜置 1 分鐘，
10000 rpm 離心過濾，此步是為了增加柱子過濾雜質(zhì)及腐殖酸的能力。
g.將步驟 e 得到的上清液加入到處理過的純化柱中,低速離心
（2000g）過濾,收集下濾液（下濾液含有 DNA）。
h. 準(zhǔn)確估計下濾液的體積，加入 0.6 倍體積的異丙醇，充分混勻，
13000 rpm 離心 10 分鐘，小心倒掉上層懸液，倒扣離心管 2 分鐘晾
干，最后用 30ul 洗脫緩沖液 EB 溶解沉淀即可。(注：如果沉淀還不
是很干凈，還可以用 70%乙醇洗滌沉淀兩次，最后用洗脫緩沖液 EB
溶解)
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